获得纯培养基

原核生物甚至可以在最恶劣的气候和最恶劣的条件下生长。在没有保护的人类无法生存的环境中，如海洋深处、火山口或极地地区，有着蓬勃发展的原核生物物种。事实上，许多科学家认为，如果其他行星上存在生命，它可能与这些微生物相似。然而，每个物种都有一套有限的环境条件，可以在其中生长；即便如此，只有在有特定营养素的情况下，它才会生长。一些原核生物

在自然界中，许多不同的有机体，包括细菌，作为一个混合种群生活在一起，共同促成其周围环境中的许多活动和过程。在实验室里，细菌被分离出来并在纯培养物中生长，以研究特定物种的功能。纯培养被定义为从一个细胞中衍生出来的有机体群体，因此与所有其他物种分离。然而，目前估计只有1%的原核生物能够成功培养。这使得研究

84第4章原核生物生长环境微生物动力学。幸运的是，大多数已知的具有医学意义的细菌可以在纯培养基中生长。

纯培养物是使用各种特殊技术获得的。所有玻璃器皿、介质和仪器在使用前必须无菌或无微生物。然后使用无菌技术进行处理，这是一种将意外引入其他生物体的可能性降至最低的程序。细胞生长的培养基是溶解在水中的营养物质的混合物，可以是液体肉汤或凝固的凝胶状形式。■ 无菌技术，第112页■ 灭菌，第109页

在固体培养基上培养细菌

获得纯培养物的基本要求是固体培养基、可保持在无菌条件下的培养基容器以及分离单个细胞的方法。一个单独的细菌，在适当的营养素供应下，将在有限的区域内的固体培养基上繁殖，形成一个菌落，这是一个由所有细胞组成的群体，所有细胞都是从原始细胞中分化出来的（图4.1）。要使一个菌落肉眼容易看到，大约需要100万个细胞。

琼脂是一种从海藻中提取的多糖，用于固化特定的营养液。与明胶等其他凝胶剂不同，很少有细菌能降解琼脂。它在高温下不会被破坏，因此可以通过加热灭菌，这一过程也可以使其液化。融化的琼脂将保持液态，直到冷却到45°C以下。因此，在琼脂硬化之前，可以在较低的温度下添加在高温下会被破坏的营养素。一旦凝固，琼脂培养基将一直保持这种状态，直到加热到95°C以上。因此，与37°C下呈液态的明胶不同，琼脂在大多数细菌生长的整个温度范围内保持固态。琼脂也是半透明的，可以更容易地看到嵌入固体培养基中的菌落。■ 多糖，第29页

培养基装在皮氏培养皿中，皮氏培养皿由两部分组成，由玻璃或塑料制成，有盖容器。虽然皮氏培养皿不密闭，但确实排除了空气中的微生物污染物。一旦皮氏培养皿中含有培养基，最常被称为

图4.1琼脂培养基上生长的菌落

作为该培养基类型的平板，例如营养琼脂平板或更简单的琼脂平板。

条纹板法

条板法是分离细菌最简单、最常用的技术（图4.2）。将灭菌接种环浸入含有所需有机体的溶液中，然后在琼脂平板上轻画几次，形成一组平行条纹，覆盖大约三分之一的平板。然后对环进行灭菌，并在与之前的平行条纹成一定角度的地方形成一系列新的平行条纹，覆盖板的另三分之一。这一动作将一些在平板第一部分上划线的细胞拖到未接种的部分，形成一个含有更稀接种物的区域。再次对环进行消毒，并形成另一组平行条纹，将一些已移动到第二部分的生物体拖入第三区域。这样做的目的是减少每一系列连续条纹所扩散的细胞数量，有效稀释细胞浓度。到第三组条纹时，细胞应充分分离，以便形成明显的、隔离良好的菌落。

保持股票文化

一旦获得了纯培养物，就可以将其作为储备培养物进行保存，这是一种储存起来的培养物，在以后的程序中用作接种物。库存培养物通常以琼脂斜面储存在冰箱中。这是一种琼脂培养基，在培养基凝固时以浅角度固定在试管中，形成更大的表面积。为了长期储存，储备培养物可以在-70°C的甘油溶液中冷冻。甘油可以防止冰晶破坏细胞。或者，细胞可以冻干或冻干。■ 冻干，第124页

继续阅读此处：细菌生长原理

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