螯合治疗冠心病

螯合保护心脏的天然奇迹

螯合疗法已被证实在溶解阻塞动脉的斑块方面有高达82%的效果!在电子书《螯合保护心脏的自然奇迹》中,你会发现:许多医生忽视Edta螯合甚至公开拒绝它的令人沮丧的原因。就连美国心脏协会也承认,致命的心脏手术是不必要的。心脏病和中风的隐藏迹象和症状?你现在有危险吗?心脏和血管疾病缩短的平均寿命。你能把它们拿回来吗?心脏病的最新危险因素(它们可能会让你大吃一惊!)政府暗中保护大型制药公司,让Edta螯合物远离公众视线。如果罗马帝国知道Edta的螯合作用,他们是如何得救的。 Why Edta chelation is guaranteed to be safeeven in extremely high doses. (It puts aspirin to shame!). The shocking truth about plaque in young childrenand how to keep your little ones safer. Why dentists, artists and welders need Edta chelationand whether your workplace is dangerous too. The differences between IV and oral chelationand which kind of Edta is right for you. Other forms of chelationand how these little-known treatments can dramatically boost your health.

螯合保护心脏的天然奇迹

等级: 11票中的4.6星

内容:电子书
作者:Michael Cutler,医学博士
价格:19.95美元

我的螯合天然奇迹,保护你的心脏综述

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Edta高压釜20

在0.5 M (pH 8.0)的条件下制备EDTA,加入186.1 g EDTA*2H2 O二钠到800 ml H2 O中,在磁力搅拌器上大力搅拌。用NaOH(大约)调整pH值至8.0。20克NaOH颗粒)。分装到等分液中,用高压灭菌法灭菌。EDTA的二钠盐直到溶液的pH值调整到大约才会进入溶液。8.0通过加入NaOH。10 mM Tris- cl (pH 8.0) 0.1 M NaCl 1 mM EDTA (pH 8.0) 100 mM Tris- cl(所需pH) 10 mM EDTA (pH 8.0) (10x Tris- clEDTA)消毒在液体循环中,在15 psi (1.05 kg cm 2)的压力下高压灭菌20分钟。在室温下储存缓冲液。

食谱O Edta

在0.5 M (pH 8.0)的条件下制备EDTA,加入186.1 g EDTA*2H2 O二钠到800 ml H2 O中,在磁力搅拌器上大力搅拌。用NaOH(大约)调整pH值至8.0。20克NaOH颗粒)。分装到等分液中,用高压灭菌法灭菌。EDTA的二钠盐直到溶液的pH值调整到大约才会进入溶液。8.0通过加入NaOH。10 mM Tris- cl (pH 8.0) 0.1 M NaCl 1 mM EDTA (pH 8.0) 5 (v v) Triton X-100 100 mM Tris- cl(所需pH值)10 mM EDTA (pH 8.0) (10x Tris . clEDTA)消毒在液体循环中,在15 psi (1.05 kg cm 2)的压力下高压灭菌20分钟。在室温下储存缓冲液。

环醇脱氢酶仲醇脱氢酶膜结合

在醋酸菌膜组分中发现了一种催化环醇氧化的藜麦蛋白。经过广泛筛选,筛选出frateurii葡萄球菌CHM 9。EDTA与膜组分处理表明,膜结合环醇脱氢酶是一种依赖于pqq的脱氢酶。从膜组分中纯化出依赖于pq的环醇脱氢酶。相比之下,从同一生物体的细胞质部分,一个nadd依赖性的环醇脱氢酶被纯化和结晶。两种不同定位酶的底物特异性表现出有趣的对比,提示它们在生物体中不同的生理作用。与已知的胞质NAD(P) h依赖性醇醛或醇酮氧化还原酶不同,pq依赖性酶不能催化环酮或脂肪族酮还原为环醇或脂肪族仲醇。

欧洲药典231

许多阴离子被提到会引起干扰。络合物的形成可通过EDTA、草酸、氟和磷酸盐的存在而完全消除,有机阴离子通过与钙的络合物形成,无机阴离子通过钙的沉淀而消除。柠檬酸盐、碳酸盐、酒石酸盐和硼酸盐也会引起干扰,但只有在高浓度存在时才会引起干扰。

阿拉伯糖醇脱氢酶膜结合

用HPLC - sds - ARDH检测PQQ的解离。用十二烷基- p -麦芽糖苷代替Triton X-100进行酶溶,在纯化的ARDH中检测到PQQ和泛素-10 (UQi0)。更重要的是,当膜组分经20 mmol L-1 EDTA处理过夜时,ARDH活性下降,但随后加入PQQ和Ca2+使酶活性恢复到原来的水平。

羰基胺的强一级结合位点可能有助于羟基配位

通过对由1,3-二氨基丙烷和d-木糖、d-核糖或d-阿拉伯糖等戊糖形成的-糖胺配体与溶液中的Ni2+配合物的圆二色性研究,得出结论:两个三叉形-糖胺配体与一个Ni2+配位,每个配体经向由糖部分的初级氨基、n -糖苷次氨基和C2羟基结合。对于d -核糖衍生物,这种结合模式通过x射线结构分析得到了证实。有趣的是,镍三(2-氨基乙基)胺(OH)2与甲基- d -吡喃葡萄糖苷或蔗糖38反应可得到双阴离子型糖苷配体的结晶Ni2+配合物。在后一种情况下(C2)O和(C3)O螯合发生在双糖的葡萄糖部分。需要注意的是,这里去质子化的羟基参与了Ni2+的结合。

将Dna转移到坚固的载体上

将Dna转移到尼龙膜中

Tris-acetate SSPE(钠盐phosphate-EDTA缓冲)0.04米,0.1毫米EDTA, pH值8.0 - 0.09 M三磷酸酯,0.2 EDTA, Tris-borate pH值8.0 - 0.045米,0.1米的EDTA, pH值8.0 (5 x股票)0.1米拖把、pH值7.0 40毫米醋酸钠5毫米EDTA, pH值8.0 (20 x股票)3.0 M氯化钠,0.3 M柠檬酸钠,pH值7.0 (20 x股票)氯化钠3.6米,0.2米NaH2 PO4 H2 O, 20毫米EDTA, pH值7.7 - 0.5 M氢氧化钠50甘油,EDTA 1毫米,0.25

丙烯酰胺微卫星

微卫星不稳定

检测突变和序列变异heteroduplex分析CFTR基因。用PCR扩增CFTR基因外显子10进行异质双工分析。凝胶厚1.5毫米,长40厘米1X MDE (Cambrex Bio Science Walkersville, Inc.),含有15个尿素。凝胶在0.6X tris -硼酸- edta缓冲液中运行21,000 V-h,并用溴化乙锭染色。通道1和13个大小标记(100 bp梯),巷2毫米纯合子在470位置,巷3是一个结合体VV在470位置,巷4是一个杂合子M470V多态性,巷5是AF508突变纯合子,巷6是一个AI507野生型杂合子,巷7是一个复合杂合子AF508和I506V巷8复合杂合子AF508和F508C巷9是一个复合杂合子AF508和Q493X巷10是一个I506V野生型杂合子,11巷为F508C野生型杂合子,12巷为AF508野生型杂合子。

角膜变性5621钙化带角膜病变

在眼球萎缩的前房慢性炎症(慢性葡萄膜炎和角膜炎)或幼年多发性关节炎患者中,Bowman层出现钙化沉积,导致睑裂区域出现横向模糊区。角膜缘区域保持清晰(图5.15)。这种变化会严重损害视力。用EDTA钠溶液螯合钙化物可以完全去除浑浊,恢复视力。b EDTA溶液螯合钙化沉积物后的结果。b EDTA溶液螯合钙化沉积物后的结果。

特定的微量营养素缺乏

缺锌与原发性有关免疫缺陷疾病,如常见的可变免疫缺陷或低丙种球蛋白血症,迪乔治综合征和IgA缺乏,以及其他情况包括胎儿酒精综合症镰状细胞病乳糜泻、肠炎和腹泻。在大疱性表皮松解症和对地中海贫血中,由于螯合疗法需要清除贫血慢性输血继发的过量铁,导致缺锌。缺锌可抑制Th1细胞因子反应、胸腺激素活性和淋巴生成1,58,68。肠病肢端皮炎是一种锌吸收的遗传缺陷,在婴儿时期表现为皮损(急性皮炎或角化过度斑块)、腹泻、脱发增加了感染的易感性,并通过补充锌来解决。

临床凝血实验室的分子检测

因素莱顿等位基因

采集患者的edta抗凝外周血,并从白细胞中提取DNA。随后,在典型的PCR试验中,模板DNA与一对针对目标基因序列的长短不一的寡核苷酸引物混合。在热循环器中经过无数次变性、退火和聚合酶扩展(合成)的循环后,得到一个PCR产物,然后可以用几种不同的方法之一进行分析(56)。在多重PCR中,一次试验可以获得多个PCR产物。已经开发了几种手动和自动多重PCR方法,用于同时检测V Leiden因子、凝血酶原20210A突变和MTHFR突变(57-59)。

培养的收获和裂解

大小为15kb的质粒在细胞裂解和后续处理过程中容易受损。温和裂解的最佳方法是将细菌悬浮在蔗糖等渗溶液中,并用溶菌酶和EDTA(乙二胺四乙酸)处理它们,这会去除大部分细胞壁。所得到的球质体通过添加阴离子洗涤剂如SDS来裂解。关于大型DNA的温柔处理方法,请参阅第二章中关于尽量减少DNA分子损伤的信息面板。

单克隆抗体的碎片化

抗体碎片无花果蛋白酶

木瓜蛋白酶被重金属它与巯基络合。它通常以“汞酸”的形式供应,以防止自身消化。无论汞是否存在,与EDTA螯合任何二价阳离子以确保酶的最大活性是一个很好的做法。木瓜蛋白酶在使用前应在0.1 M Tris-HCl, pH 8.0,含有2mm EDTA和1mm二硫苏糖醇的环境中短暂孵育“激活”。(1)木瓜蛋白酶(1-2 mg ml)在pH 8.0,含2mm EDTA和1mm二硫苏糖醇的0.1 M Tris-HCl中,在37℃下活化15分钟,不含硫醇,发现没有Fab片段,但F(ab’)2片段可在50率中回收。Mariani等人(1991)发现,在50 raM Tris-HCl、2mm EDTA、pH 7.0、含有1 mM半胱氨酸的Tris-HCl中,在37℃、酶底物比为1.3、2-8小时内,用硫醇蛋白酶ficin消化小鼠IgGl,可获得F(ab’)2片段的高产量。

神经退行性疾病与金属离子

很明显,迫切需要开发新的药物和种类的药物,比目前(仅部分)可用的螯合疗法更精确和更优雅地操纵金属为中心的神经病理。希望这本书能刺激这一方向的研究。

细胞培养用培养基试剂和原液

乙二胺四乙酸(EDTA)溶液0.02 EDTA (Sigma, St. Louis, MO)在PBS中用于常规传代,0.08 EDTA在PBS中用于EB生长产物的复制,通过0.22- im过滤器进行过滤灭菌。4.将胰蛋白酶溶液和EDTA溶液混合。17.TE缓冲液10mm Tris-HCl, 1mm EDTA, pH 7.5,通过0.22- m过滤器灭菌。18.10X Loening solution 1.8 M Tris-HCl, pH 7.7, 1.5 M NaH2 PO4 H2 O, 50 mM EDTA,和高压釜。20.5X TBE将54 g Tris-base和27.5 g硼酸溶解在milliq水中,加入20 mL 0.5 M EDTA, pH 8.0,用milliq水调至1 L。

天然Aspnat的分子大小

采用不同的均质化和增溶条件,测试了天然Asp-NAT的大分子尺寸是否为酶制备方法的伪产物。线粒体中常用的缓冲液蛋白质纯化(tris -蔗糖培养基Tris-HCl, 50 mM 1 mM EDTA 0.32 M蔗糖1 mM DTT蛋白酶抑制剂混合物,根据加工组织pH调整为7.4的量)获得大鼠脑线粒体粗粒。各种各样的洗涤剂对脱氧胆酸颗粒(DC)(带负电荷,是线粒体研究中最常用的洗涤剂之一)、十六烷基三甲基溴化铵(带正电荷,通常称为CTAB)、Triton X-100(非离子型)、月桂基麦醇糖(LM)(非离子型,通常用于线粒体蛋白质重建实验)和CHAPS进行了溶解试验。

质粒DNA制备

插入失活Pbr322

大的质粒(50kb或千碱基)很容易被破坏,必须通过轻微的裂解来将其从细胞中释放出来,以减少渗透冲击。这就减少了由于受压细菌细胞被破坏而产生的剪切力。更严厉的方法是用来裂解含有更小的质粒的细菌,例如你将在本单元净化的质粒。这些方法通常使用乙二胺四乙酸(EDTA)螯合二价阳离子,使外膜具有渗透性。因为核酸酶的活性需要二价阳离子(Mg2+),所以裂解液中的EDTA可以保护DNA不被降解。许多程序使用溶菌酶来水解肽聚糖层(图1.1)。为了分离出这些质粒中的一种,你将使用一种标准的迷你制备方法,使用EDTA,溶菌酶,碱和SDS来溶解细胞。

特定工业职业

Rodier将该综合征分为三个阶段前驱期、中间期和确定期。第一阶段的特征是运动障碍和冷漠,随后是锰精神病.在这一阶段,步态被描述为蹒跚,患者变得具有攻击性。中期的早期特征是发音过弱声音冻结,面部伪装,情绪不稳定。在最后阶段,患者出现僵硬、运动迟缓、震颤、屈曲姿势、拖步步态和姿势不稳。一些患者出现张力障碍,步态宽阔,称为鸡巴步态。尽管停止了接触,大多数人的疾病进展为完全残疾在另一份报告中,13名智利锰矿工中只有1人(50人)出现步态障碍,尽管这种前驱性精神障碍在当地称为locura man-ganica,很常见。田中et al。

活体DMS治疗

裂解缓冲液1 20 mM Tris-HCl, pH 8.0, 20 mM NaCl, 20 mM EDTA, 1十二烷基硫酸钠(SDS)。4.裂解缓冲液2 150m M NaCl, 10m M EDTA, pH 8。4.核制备缓冲液:300 mM蔗糖,10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 15 mM NaCl, 60 mM KCl, 5 mM MgCl2, 0.1 mM乙二胺四乙酸,0.15 mM精胺,0.5 mM亚精胺,0.1 Nonidet-P40, 0.5 mM苯甲基磺酰氟(PMSF)新鲜制备或在-20℃保存,除精胺、亚精胺和PMSF(见注释2)。核酸酶消化缓冲液300mm蔗糖,10mm Tris-HCl, pH 7.5, 15mm NaCl, 60mm KCl, 5mm MgCl2, 0.1 mM乙二胺四乙酸,0.15 mM精胺,0.5 mM亚精胺。7.裂解缓冲液50 mM Tris-HCl, pH 8.0, 20 mM EDTA, 1 SDS, 500 g mL蛋白酶k。2X结合和洗涤缓冲液(B&W缓冲液)10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 1 mM EDTA, 2.0 M NaCl。29. Formamide-EDTA-XC-BPB gel loading buffer (10 mM EDTA, 0.1 bro-mophenol blue, 0.1 xylen cyanol FF in formamide). 31. 1X TBE (89 mM Tris-borate, 2 mM EDTA).

兔、羊、山羊IgG与葡萄球菌蛋白A和链球菌蛋白G的结合

从兔子、山羊和绵羊身上生产IgG Fab片段非常简单。9.5节中描述的基本原则和过程可以稍加修改就适用(参见Mage, 1980)。用亲和层析法可纯化IgG蛋白质G(见15.4.1节),或通过仔细的硫酸铵沉淀(见9.2.1节),并对0.1 M Tris-HCl, 1mm EDTA, pH 8.0透析。进一步的纯化通常是不必要的,但可以通过离子交换色谱法或凝胶过滤(见第9章)。用木瓜蛋白酶在0.1 M Tris-HCl, 1mm EDTA pH 8.0(或PBS + 1mm EDTA)加上少量还原剂(25mm巯基乙醇或1-2 mM二硫代糖醇)中进行消化。的酶底物比

土壤中酶的提取

粪便脂肪排泄奥利司他

漆酶、多酚氧化酶、磷酸酶、磷酸二酯酶、芳基硫酸化酶、纤维素酶、木聚糖酶、3-葡萄糖苷酶、转化酶和蛋白酶,通过在pH值为7-8的条件下用磷酸- edta搅拌牧场土壤1小时提取(Mayaudon et al. 1973 Batistic et al. 1980),被认为是真菌的糖酶,它们被包裹在革兰氏阴性菌合成的脂多糖中,从而防止蛋白质水解(Mayaudon 1986)。也有人假设,这些多酶脂多糖复合物是通过钙桥连接到腐殖质基质上的,由于EDTA螯合了这些钙离子,它们被磷酸盐萃取(图4.2)。Mayaudon(1986)认为,真菌酶和细菌脂多糖之间的相互作用发生在细菌脂多糖释放到土壤环境后的部分水解之后。

pKN800类溶出psfidest的琼脂糖凝胶电泳

将0.8 g琼脂糖加入100ml的1 × TAE缓冲瓶中(0.04 M乙酸三乙酸和0.001 M EDTA)。用记号笔在烧瓶上标记液体的高度。将液体煮沸并旋转,直到琼脂糖完全溶解。使用耐热手套握住烧瓶,轻轻地旋转烧瓶,以防止熔化的琼脂糖溢出。未溶解的琼脂糖呈小而透明的颗粒漂浮在溶液中。加入蒸馏水以取代蒸发的液体。使用微波炉,热板,或蒸笼融化琼脂糖。

细胞破裂取决于细胞类型和生长

物理方法破裂细胞通常对革兰氏阴性菌比革兰氏阳性菌更有效,因为后者的肽聚糖层更厚。肽聚糖层的强度不仅取决于其厚度,还取决于肽交联的程度(Pisabaro et al. 1985)。交联的数量在不同物种之间可能有所不同,但对每个物种来说,它也取决于生长速度。增长必然意味着这堵墙必须被削弱,以允许它扩张(Koch 2001)。大肠杆菌肽聚糖层的交联程度在缓慢生长的细胞中高于快速生长的细胞,在静止期细胞中交联程度最高(Pisabaro et al. 1985),并且静止期大肠杆菌和枯草芽孢杆菌被发现比指数生长的细胞更能抵抗超声作用(Lindahl和Bakken 1995)。

血小板在采集过程中因活化而凝结

由edta依赖性抗体、冷凝集素或药物引起的假性血小板减少。对于乙二胺四乙酸(EDTA)相关问题,请重新检查血小板计数使用替代抗凝剂(如肝素)。b .破坏性血小板减少症1.免疫性血小板减少症

膜的清洗和卫生处理

清洁方案中发现的成分包括酸、碱、螯合剂、洗涤剂和酶。最常用的酸包括磷酸、柠檬酸、硝酸、硫酸和盐酸。这些酸通过与盐沉积物和金属氧化物发生反应,产生更容易在漂洗溶液中溶解的盐的氯化物形式,从而清洁膜。除了酸,碱也发现在许多清洁协议。通常用于膜清洗的碱包括氢氧化钠、磷酸盐(如磷酸三钠)和次氯酸钠(漂白剂)。氢氧化钠是去除生物污染物的一种特别有效的清洗剂,但并不是所有的膜化学制品都与这种腐蚀性试剂的反复暴露相容。清洗后从系统中去除的氢氧化钠很容易通过pH值测量来识别。表面活性剂也被广泛用于膜的清洁,通过溶解疏水污染物。

Pcr反应的优化

许多不同的因素可以显著地影响PCR的敏感性和特异性,包括(1)寡核苷酸引物设计,(2)PCR循环参数(循环次数、循环次数、温度),(3)PCR混合物的组成(Mg2+浓度)。对于大多数PCR应用,最关键的参数是所用寡核苷酸引物的退火温度。最大退火温度由Tm最低的底漆决定。超过这个Tm几度将降低寡核苷酸引物退火到目标序列的能力,并可能导致无法生产感兴趣的产品。如果退火温度等于寡核苷酸引物的Tm不能产生所需的产物,那么可能有必要进一步降低退火温度。

自由基和抗氧化剂导论

一般来说,要叫抗氧化剂,化合物必须能够提供一个电子和或氢原子,并防止或延迟可氧化底物的氧化。它们可以通过金属螯合(防止自由基形成)、清除等不同方式起作用自由基,作为链断裂(阻止自由基的传播),是氧化还原的一部分抗氧化剂网络,或调节基因表达。

实验室的问题

各种来源的DNA都可用于检测。乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝外周血是最常提交的标本,然而,DNA、冷冻组织或培养细胞也可以使用。石蜡包埋组织、颊上皮细胞、未纺羊膜细胞或直接绒毛膜绒毛取样(CVS)标本可用于DNA序列分析检测点突变,然而,这些样本不能提供足够数量的高分子量基因组DNA印迹分析

产品案例研究

昂塔克(商标名,也被称为denileukin diftitox)是一种工程融合蛋白质在大肠杆菌中通过重组方式产生。1999年,它在美国获得了通用医疗许可,并被指用于治疗皮肤t细胞淋巴瘤(CTCL)患者。融合产物由直接与IL-2连接的白喉毒素片段A和B组成。它显示分子量为58 kDa,并使用反相色谱和纯化diafiltration.该产品是一种含有柠檬酸,EDTA和聚山梨酯作为辅料的无菌冷冻溶液。它呈现在一次性使用的小瓶中。该产品通常是静脉注射,每天连续五天,每3周治疗期间。

包括acgih区域区域

各种因素改变从胃肠道的吸收,增强或抑制其屏障功能。胃肠运动的减少通常有利于增加吸收。特定的胃内容物和分泌物可能与污染物发生反应,并可能将其改变为具有不同物理化学性质的形式(如溶解度),或者它们可能吸收污染物,改变可用的化学物质,并改变易位率。摄入的微粒大小也会影响吸收。因为溶解的速度与颗粒的大小成反比,大颗粒被吸收的程度较小,尤其是当它们一开始就相当不溶的时候。某些化学物质,如EDTA等螯合剂,也会引起许多材料的非特异性吸收增加。

酸性洗涤木质素

NDF含量的测定方法是在沸腾的中性洗涤溶液中提取0.5 g样品(3 (w v)十二烷基硫酸钠(SDS十二烷基硫酸钠)),18 mM四硼酸钠十水(Na2B4O7)。10 H2O)、32 mM磷酸钠(二碱式N2HPO4)、50 mM Na2-EDTA和1 (v v)乙二醇(2-乙氧基乙醇)浸泡1 h。将悬浮液过滤,用热水和丙酮清洗过滤器上的细胞壁残渣。样品在100℃下干燥一夜后称量。

包涵体表达蛋白的纯化

外国的表达蛋白质在大肠杆菌中,高水平的表达常常导致包涵体的形成,由表达蛋白的不溶性聚集物组成。通过离心从细菌裂解物中回收包涵体,并用Triton X-100和EDTA洗涤,以从聚集的外源蛋白中去除尽可能多的细菌蛋白。为了获得可溶性蛋白质,将洗涤过的包络体溶解在变性剂中,然后通过稀释或逐渐去除变性剂将释放的蛋白质重新折叠透析.这里所给出的程序已被用来溶解prorennin包涵体。然而,每种蛋白质可能需要稍微不同的程序,这必须通过经验来确定。

酶溶菌作用

无色肽酶是从溶色杆菌中提取的一种蛋白酶,它通过分裂细菌的肽交叉键来攻击其肽聚糖层。商用的溶菌色肽酶试剂可能同时含有水解蛋白酶和水解蛋白酶,也可能含有其他蛋白酶(Li等,2000年)。α蛋白酶攻击多糖-肽键以及D-Ala-Gly和Gly-Glu键(Li et al. 1997), β蛋白酶裂解甘氨酸- x肽键(Li et al. 1998)。无色肽酶的特点是具有非常高的蛋白水解活性、宽的pH值范围和高的变性稳定性。例如,在0.1 SDS和5 M尿素存在的情况下,褪色肽酶保持高活性(Tsunasawa et al. 1989)。然而,已经观察到螯合剂(EDTA和菲罗啉)的抑制作用,这表明褪色肽酶是金属蛋白(Li etal . 2000)。因此,避免EDTA(或其他螯合剂)作为色肽酶鸡尾酒的添加剂可能是明智的。

人工泪液

多剂量人造泪液制剂中含有防腐剂,降低了细菌污染的风险。苯扎氯铵、EDTA和聚季铵盐-1是人工泪液制剂中常用的防腐剂。由于可能产生与防腐剂相关的毒性,如果经常使用,必须采取一些预防措施使用含有防腐剂的溶液。

透析缓冲

50mm Tris-Cl (pH 8.0) 10mm EDTA (pH 8.0)准备四批4升透析在0.5 M (pH 8.0)条件下制备EDTA,加入186.1 g EDTA*2H2 O二钠到800 ml H2 O中,在磁力搅拌器上大力搅拌。用NaOH(大约)调整pH值至8.0。20克NaOH颗粒)。分装到等分液中,用高压灭菌法灭菌。EDTA的二钠盐直到溶液的pH值调整到大约才会进入溶液。8.0通过加入NaOH。

缓冲液添加剂

RNA可以在10-mM磷酸钠,pH值7或MOPS缓冲液(20 mM 3- N-morpholino丙磺酸,pH值7,8-mM醋酸钠,1 mM EDTA, pH值8)中分离。RNA样品在二甲亚砜,1.1 M乙二醛(乙烷1.2二酮)和0.01 M磷酸钠,pH值7中培养,在将样品加载到凝胶上之前,使RNA变性。由于运行过程中pH值漂移(阴极pH值下降,阳极pH值增加),缓冲液应该从镀液的阳极端再循环到阴极端(图5-8)。这可以通过使用蠕动器来完成

透析缓冲区622

0.5 mM EDTA (pH 8.0)准备6升透析缓冲区6-2-2。在0.5 M (pH 8.0)的条件下制备EDTA,加入186.1 g EDTA*2H2 O二钠到800 ml H2 O中,在磁力搅拌器上大力搅拌。用NaOH(大约)调整pH值至8.0。20克NaOH颗粒)。分装到等分液中,用高压灭菌法灭菌。EDTA的二钠盐直到溶液的pH值调整到大约才会进入溶液。8.0通过加入NaOH。