酸性洗涤剂木质素

酸性洗涤剂木质素(ADL)是顺序分析的一部分,用于确定与苜蓿和各种牧草等饲料样品的消化率和饲料质量相关的特征(Van Soest,1967)。该分析包括中性洗涤剂纤维(NDF)、酸性洗涤剂纤维(ADF)和ADL的重量测定(Van Soest,1963;Van Soest and Wine,1967)。NDF是总细胞壁含量(纤维素、半纤维素和木质素)的度量。从NDF中减去ADF可以得到半纤维素含量的估计值,而从ADF中减去ADL可以得到纤维素含量的估计值(Jung,1997)。

NDF含量通过在沸腾的中性洗涤剂溶液(3%(w/v)十二烷基硫酸钠(SDS;十二烷基硫酸钠))、18 mM十水四硼酸钠(Na2B4O7.10 H2O)、32 mM磷酸钠(二元酸;N2HPO4)、50 mM Na2中提取0.5 g样品来测定-EDTA和1%(v/v)乙二醇(2-乙氧基乙醇)作用1小时。过滤悬浮液,并在热水和丙酮中清洗过滤器上的细胞壁残留物。在100°C下干燥过夜后,对样品进行称重。

通过在200 mL酸性洗涤剂溶液(0.5 M硫酸,2%(w/v)CTAB)中煮沸1 h,在干燥的NDF样品上测定ADF

(十六烷基三甲基溴化铵)),然后过滤,热水洗涤,丙酮冲洗。在100°C下过夜培养后,对所得ADF残留物进行称重。然后将ADF残留物在12 M硫酸中水解3小时。通过过滤收集剩余的不溶性残留物,用热水冲洗,用丙酮冲洗,并在100°C下过夜干燥。ADL表示为该干燥残留物(含木质素和矿物质)之间的重量差,以及在450°C下加热5小时后剩余的残渣,仅含有矿物质。

Hatfield等人(1994年)比较了Klason和ADL方法对来自代表不同成熟度(因此木质化程度)的各种物种的样品的影响。虽然两种方法都表明木质素含量随着成熟度的增加而增加,但克拉森木质素所有样本的含量始终高于ADL含量。这种差异可能是Klason木质素受到蛋白质污染的结果。作为日常生活能力测定的一部分,蛋白质用中性洗涤剂溶液去除。为了更详细地研究这一点,Hatfield et al.(1994)测定了不同样品的N含量,并报告了N含量与木质素含量之间的负相关,表明蛋白质并不是Klason木质素值较高的原因。通过对分离的细胞壁多糖进行添加氮(牛血清白蛋白、赖氨酸或硫酸铵)的程序,进一步证实了这一点。添加氮气不会影响回收的残留物量。Klason木质素和ADL的N含量均归因于与其他细胞壁成分交联的细胞壁蛋白。因此,ADL和Klason木质素之间的差异很可能是一些木质素在酸性洗涤剂溶液中溶解的结果(Hatfield和Fukushima,2005)。根据热解气相色谱-质谱(见1.3.4),两种残留物之间的木质素亚基组成没有显著差异。ADL含有萃取过程中产生的一些污染物。Hatfield et al.(1994)得出的结论是,虽然这两种方法对表征饲料样品都有价值,但Klason木质素测定结果更好地代表了实际木质素含量。

继续阅读此处:液相色谱HPLC和LCMS

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